發(fā)布時間：2026-01-06
摘要
背景：當歸芍藥散是一種常用的中藥方劑，在治療阿爾茨海默病方面已顯示出臨床療效。本研究旨在探討DSS及其拆方（酸甘湯與辛甘湯）在治療AD中的療效差異，以及DSS恢復(fù)AD自噬的機制。
方法：采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)策略闡述DSS在AD中的生物活性成分、相關(guān)靶點及調(diào)控機制，包括靶點預(yù)測、PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析、GO和KEGG通路富集分析。采用腦室注射Aβ1-42誘導(dǎo)的AD小鼠模型，評估DSS及其拆方對AD的治療效果。采用Morris水迷宮評估認知功能。通過RT-qPCR和ELISA定量炎癥細胞因子表達水平。采用Western blot檢測AD病理標志物及AMPK/mTOR信號通路相關(guān)蛋白的表達。
結(jié)果：從數(shù)據(jù)庫和文獻中篩選出50個活性化合物和718個HUB基因。KEGG和GO分析表明，DSS抗AD的潛在機制涉及AMPK/mTOR信號通路和線粒體自噬。體內(nèi)動物實驗結(jié)果表明，DSS、SG和XG治療改善了小鼠的認知功能并減輕了神經(jīng)炎癥，緩解了神經(jīng)元細胞的病理變化，提高了PSD-95蛋白水平，降低了APP和p-Tau水平。其中，DSS效果最佳。此外，DSS、SG和XG上調(diào)了LC3、Beclin1和p-AMPK的表達，同時降低了P62和p-mTOR的表達。
結(jié)論：DSS、SG和XG可能通過AMPK/mTOR自噬信號通路，改善了Aβ1-42注射小鼠的AD相關(guān)病理癥狀。
關(guān)鍵詞：阿爾茨海默?。划敋w芍藥散；自噬；AMPK/mTOR
本研究探討了經(jīng)典中藥復(fù)方當歸芍藥散及其拆方（酸甘湯、辛甘湯）對阿爾茨海默病的治療作用及機制。核心發(fā)現(xiàn)如下：
療效驗證：在Aβ1-42誘導(dǎo)的AD小鼠模型中，DSS及其拆方均能顯著改善小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力（Morris水迷宮測試），減輕神經(jīng)炎癥（降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平及小膠質(zhì)細胞標記物IBA1表達），改善海馬神經(jīng)元病理形態(tài)，上調(diào)突觸蛋白PSD-95表達，并降低AD關(guān)鍵病理蛋白APP和p-Tau的水平。其中，全方DSS的改善效果最為顯著。
作用機制：網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析預(yù)測DSS抗AD的潛在機制與AMPK/mTOR信號通路和自噬相關(guān)。實驗驗證表明，DSS及其拆方能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3-II和Beclin1的表達，下調(diào)自噬底物蛋白P62的表達，同時激活A(yù)MPK（增加p-AMPK）并抑制mTOR（減少p-mTOR），表明其能夠恢復(fù)由Aβ誘導(dǎo)的自噬抑制，這一過程可能通過調(diào)控AMPK/mTOR信號通路實現(xiàn)。
方劑配伍意義：研究對比了全方DSS與拆方SG、XG的效果，發(fā)現(xiàn)全方療效優(yōu)于各拆方，體現(xiàn)了中藥復(fù)方多成分、多靶點協(xié)同作用的“配伍”優(yōu)勢與理論精髓。
網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測：
從TCMSP數(shù)據(jù)庫篩選DSS六味藥材的活性成分（OB≥30%，DL≥0.18），并補充文獻報道的有效成分，共得50個。
通過Swiss Target Prediction預(yù)測活性成分靶點。
從OMIM、GeneCards等疾病數(shù)據(jù)庫獲取AD相關(guān)靶點。
取藥物靶點與疾病靶點的交集，得到299個DSS治療AD的潛在關(guān)鍵靶點。
構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，篩選出核心靶點。
對關(guān)鍵靶點進行GO功能和KEGG通路富集分析，提示AMPK/mTOR信號通路和自噬是重要通路。
分子對接顯示DSS主要活性成分（如芍藥苷、阿魏酸、白術(shù)內(nèi)酯III等）與AMPK、mTOR蛋白具有良好的結(jié)合活性。
體內(nèi)動物實驗驗證：
模型建立：對C57BL/6J小鼠進行雙側(cè)腦室注射聚集態(tài)Aβ1-42，建立AD模型。
分組給藥：分為假手術(shù)組、模型組、DSS組、酸甘湯組、辛甘湯組、陽性藥多奈哌齊組。灌胃給藥28天。
行為學(xué)評估：給藥后第21天開始進行Morris水迷宮測試，評估學(xué)習(xí)記憶能力。
樣本采集與分析：行為學(xué)測試后處死小鼠，取腦組織。
分子生物學(xué)：RT-qPCR和ELISA檢測炎癥因子（IL-1β, IL-6, TNF-α）的mRNA和蛋白水平；Western blot檢測PSD-95、APP、p-Tau以及自噬（LC3, P62, Beclin1）和AMPK/mTOR通路（p-AMPK, p-mTOR）相關(guān)蛋白。
組織形態(tài)學(xué)：HE染色觀察海馬CA1和DG區(qū)神經(jīng)元形態(tài)；免疫組化檢測小膠質(zhì)細胞標記物IBA1的表達。
總結(jié)：本研究綜合運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實驗驗證，證實了當歸芍藥散能有效改善AD模型小鼠的認知功能障礙、神經(jīng)炎癥和神經(jīng)元損傷，其神經(jīng)保護作用可能與激活A(yù)MPK/mTOR信號通路、進而恢復(fù)細胞自噬功能有關(guān)。全方DSS的療效優(yōu)于其拆方，體現(xiàn)了中藥復(fù)方整體治療的優(yōu)勢。
展望與局限：
劑量關(guān)系：本研究未探討不同給藥劑量下的量效關(guān)系，未來可進一步細化。
機制深度驗證：目前的研究結(jié)果主要為相關(guān)性證據(jù)，未來需要利用基因敲除、特異性抑制劑等反向驗證手段，更直接地證實AMPK/mTOR自噬通路在DSS神經(jīng)保護作用中的核心地位。
評估指標：對神經(jīng)元和突觸恢復(fù)的評估指標（如PSD-95）較為有限，未來應(yīng)納入更多元的突觸前/后蛋白、電生理等指標進行全面評估。
模型拓展：本研究僅使用了Aβ腦室注射模型。為了增強結(jié)論的普適性，未來應(yīng)在APP/PS1等轉(zhuǎn)基因AD模型中進行驗證。
成分與靶點：雖然網(wǎng)絡(luò)分析篩選了成分和靶點，但具體是哪些成分通過哪些關(guān)鍵靶點驅(qū)動了核心通路，仍需進一步的細胞和分子實驗深入解析。
IF3.3
Xiaoqing Cheng, Yuqiong Dai, Baoling Shang, Shuting Zhang, Liting Lin, Qingguang Wu, Ruoting Zhan, Shengqing Li, Sijun Liu
10.1186/s12906-024-04588-x；
BMC Complementary Medicine and Therapies
1.SYP-M0026Mouse IL-1β ELISA kit
2.SYP-M0031Mouse IL-6 ELISA kit
3.SYP-M0036Mouse TNF-α ELISA kit
